二 重 免疫 染色 原理

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做免疫荧光实验中，经常要进行免疫荧光的双标记实验，也就是在同一个样本上同时进行两种蛋白的免疫荧光检测。具体的实验时，可以选择不同来源的一抗，然后再选择分别针对一抗的二抗，同时二抗上标记有不同的荧光团。一般的双标记实验里，都会选择一个绿色的（如FITC、Cy2、Dylight 488等）荧光标记，一个红色的（如Rhodamin、Cy3、TRITC、Texas Rad、Dylight 539等）的荧光标记。红绿二色的区分度很大，效果也比较理想。那么，如果是三标呢？请看看下面的一个图。 左侧的一个免疫荧光图片就包括了3种颜色，绿色FITC（FITC最大吸收光波长为490495nm，最大发射光波长520530nm，呈现明亮的黄绿色荧光）和红色罗丹明Rhodamin（最大吸收光波长为570nm，最大发射光波长为595～600nm，呈橘红色荧光）的荧光均为荧光团标记的二抗，而第三种颜色则来自于负染细胞核的蓝色DAPI染料（DAPI 的激发光波长为358 nm ,发射光波长为461 nm ,荧光激发下发蓝光，与细胞核一般来说，绿色和红色荧光重合后显示的是黄色，而橙色、黄色、红色的光非常接近，因此三标的时候，一般选择蓝色荧光。就如左图所示。 实际上，上面的示例并不是完全意义上的免疫荧光三标 ，因为DAPI只相当于负染。还有一种情况，需要同时在一个样本里通过免疫荧光技术对三种蛋白进行定位，这就需要选择第三种荧光团，而不是DAPI这样的染料。也即，一个绿色荧光标记的二抗、一个红色荧光标记的二抗，再加一个蓝色荧光标记的二抗。艾美捷 为您提供两种蓝色荧光标记的 右图所示即为AMCA蓝色荧光与FITC、Cy3等荧光的对比图例。AMCA蓝色荧光团的吸收光波长最大为350nm，发射荧光则为450nm。对于荧光由于AMCA的信号相对较弱，单标实验中不推荐使用AMCA。AMCA和荧光素的荧光波长只有很小的重叠范围，而和发出长波长荧光的荧光基团没有或者只有极少的重叠，因此它最常用于多标记实验中，比如免疫 同时，Dylight 405作为Dylight系列的荧光团，具有很多优势，包括更高的荧光强度、更好的光学稳定性和特异性、更高的性价比等。具体见荧光二抗的选择――Dylight荧光与传统荧光标记的比较 。EarthOx的部分Dylight 405荧光抗体产品如下： 作为多家国际知名品牌的中国或区域代理，艾美捷能为您提供全系列的Dylight原装进口荧光二抗，包括Jackson、KPL的大包装粉末形式的 Dylight荧光二抗 ，另外，也提供EarthOx的小包装液体形式Dylight荧光二抗，均具有很高的性价比。针对荧光标记二抗，有FITC、 TRITC、Rhodamine、PE、Cy3/5、AMCA、Dylight等多种荧光标记二抗；按照检测物种分，有抗 人、大鼠、小鼠、猪、驴、绵羊、山羊、小鸡、马、兔、仓鼠、狗、牛，以及多种细菌类二抗；另外，还有IgG、IgA、IgM以及IgG（Fc）、 IgG（ab’）2等不同类型抗体。如果您对上述产品感兴趣微信扫码进入「丁香实验」小程序

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染发剂的染色原理是什么？ ... 问题，甚至引申到致癌、致畸。但目前而言能表现出明显致癌作用的原料已被禁用（如间苯二胺），含重金属的染发剂也几乎消失，所以最应该考虑的还是与皮肤直接接触的过敏问 … 多色染色（可选步骤） 要检测同一个样品中两种或多种抗原的共同分布情况，需要使用双重免疫荧光流程。该流程可在混合物中同时进行检测，也可逐个抗原依次进行检测。 确保抗体来源于不同物种并且这些抗体有相应的二抗。例如，抗抗原 a 的兔抗体和抗抗原 b 的鼠抗体。也可使用偶联至不同荧光团的直标一抗。 用 1% BSA、22.52 mg/mL 甘氨酸的 PBST (PBS + 0.1% Tween 20) 孵育细胞 30 分钟，封闭抗体的非特异性结合（可替代的封闭液包括 1% 明胶或来源于产生二抗的物种的 10% 血清：查看抗体数据表了解相关建议）。 抗体のinformation sheetを確認 2. 0000004648 00000 n 0000001411 00000 n 0000154336 00000 n 0000012994 00000 n 0000172368 00000 n ホルマリン固定パラフィン包埋標本で免疫染色がうまくいかない時 1. 免疫荧光三标？――蓝色荧光的AMCA与Dylight 405标记二抗做免疫荧光实验中，经常要进行免疫荧光的双标记实验，也就是在同一个样本上同时进行两种蛋白的免疫荧光检测。具体的实验时，可以选择不同来源的一抗，然后再选择分别针对一抗的二抗，同时二抗上标记有不同的荧光团。 0000155125 00000 n 0000002154 00000 n 0000009149 00000 n < trailer

关键词： 用来染细胞质时，能把胶制或纤维素染成红色。在动物组织制片中用来染神经轴、弹性纤维、胚胎材料等。刚果红可以跟苏木静作二重染色，也可用作类淀粉染色，由於它能溶於水和酒精，所以洗涤和脱水处理 … 原标题：免疫组化二抗应该如何选择？责任编辑： 細胞免疫染色法 – dab染色法を中心に － 1）免疫染色の原理 免疫組織化学法は抗原-抗体反応という特異的な結合反応を利用して、目的とする蛋白質の 細胞内および組織内の局在を検出する手法である。方法は大まかに下記の2通り。 来源： 抗原賦活法を変えてみる 3. 询价列表 0000009576 00000 n 0000153876 00000 n

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